研究双歧杆菌的利器

双歧杆菌是革兰氏阳性有分叉的杆菌（Y型，如两歧双歧杆菌；也有V型，如婴儿双歧杆菌或短杆状，如长双歧杆菌）。它越来越得到人类的重视。它作为人类肠道的长期定居菌（在婴儿中甚至为显著优势菌），对人的生理作用起到不可忽视的影响，例如：它刺激机体的免疫反应，形成肠道屏障，阻止致病菌的入侵，合成人体所需的维生素等。双歧杆菌制剂常用于治疗菌群失调、腹泻、幽门螺杆菌阳性的消化道溃疡等疾病。在酸奶中加入双歧杆菌作为发酵菌种，其保健效果也大为提高。曾有的微生物学家指出：“光辉的抗生素之后的时代，将是活菌制剂的时代”。

鉴于双歧杆菌的重要价值，我们常需要将双歧杆菌同其他乳酸菌区别开来。现有的《食品安全国家标准 食品微生物学检验 双歧杆菌检验》存在一定的局限，在鉴定方面，这个标准只适合食品中仅含有单一双歧杆菌菌种的鉴定。在计数方面，它只适合食品中仅含有双歧杆菌属的计数。而在实际情况中，常常是多个菌属混杂的情况。HiMedia开发的双歧杆菌显色培养基HiCrome™
Bifidobacterium Agar，可很好地将双歧杆菌同乳杆菌区分开来。

该培养基除了含有必要的营养外，还含有牛奶蛋白，它有助于检测酪蛋白水解反应。如有该反应，则菌落会有不透明光晕（短双歧杆菌为该反应阳性）；同时含有多种显色剂，有助于鉴别乳杆菌和双歧杆菌。乳杆菌菌落在该培养基上表现为绿色菌落和不透明光晕，婴儿双歧杆菌表现为深蓝色至蓝绿色菌落，短双歧杆菌表现为粉红色菌落，有不透明光晕（见下图）。

HiMedia还提供有双歧杆菌的生化鉴定试剂盒（货号KB021），该试剂盒包含了12种生化试验，为触酶试验、阿拉伯糖试验、纤维二糖试验、果糖试验、乳糖试验、麦芽糖试验、甘露糖试验、蜜二糖试验、棉子糖试验、蔗糖试验、木糖试验、水杨苷试验。所调菌落可接种在５ml双歧杆菌肉汤（M1395）中，35-37℃厌氧培养6-18小时，直到菌液浊度≥0.1OD（620nm）或0.5麦氏单位。然后无菌打开试剂盒，撕掉封条。在鉴定卡中每孔接种50μl菌液，35℃-37℃厌氧孵育24-48小时。孵育后，完成触酶试验，在第1孔用接种环在孔内培养基生长表面刮擦取样，然后蘸到含3%H2O2溶液的干净试管中。接种环表面冒泡为阳性反应。没有冒泡为阴性反应。然后根据结果诠释表和菌种标准表，完成菌种鉴定。该试剂盒一共可鉴定35种双歧杆菌。

HiMedia公司还提供了一款双歧杆菌选择性计数琼脂（货号M1734），用于发酵乳和乳酸菌饮品中的双歧杆菌计数。该培养基含有高纯度的低聚半乳糖，很好的支持双歧杆菌生长；同时含有盐酸半胱氨酸，创造出双歧生长所需的还原条件；而培养基中的莫匹罗星则抑制大多数的乳业所用的乳酸菌生长。用标准菌株证实，接种的50-100CFU双歧杆菌能在该培养基中旺盛生长。

双歧杆菌的鉴定有助于选育优良的双歧杆菌菌株，开发双歧杆菌发酵饮品或制剂。在这方面，HiMedia的双歧杆菌显色培养基、生化鉴定试剂盒以及还可提供的双歧杆菌选择性计数琼脂，无疑为研究人员和质检人员对双歧杆菌的分离、鉴定和计数提供了极大的便利。