在食品领域,蜡样芽孢杆菌是常见的条件致病菌。其菌体并非一定致病,但其分泌的肠毒素等外毒素会导致食品中毒,尤其是该菌数量达到一定程度时。在蜡样芽孢杆菌的食品安全国家标准GB 4789.14—2014中,推荐用甘露醇卵黄多黏菌素(MYP)琼脂来进行分离。但该培养基存在一定的弊病,即对于蜡样芽孢杆菌、苏云金芽孢杆菌、簟状芽孢杆菌三者无法区分,其形态均为粉红色菌落,有晕浊圈。巨大芽孢杆菌菌落也为粉红色,无晕浊圈。同时该培养基配制也较为麻烦。
苏云金杆菌是常用的杀虫剂,近年来它引起的食物中毒也引起关注。苏云金杆菌与蜡样芽孢杆菌高度相似,较难区分。的微生物产品生产商HiMedia公司开发的芽孢杆菌显色培养基,特异性高,能较好地区分蜡样芽孢杆菌、苏云金芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌等,适合取代MYP培养基,减少后期鉴定工作。见下图。
该显色培养基品名为HiCrome™ Bacillus Agar(货号M1651),是用于分离芽孢杆菌并用于芽孢杆菌各个物种之间的鉴别。各种芽孢杆菌均可在上面生长(通常生长条件为30℃24-48小时),并表现为菌落带不同颜色。具体如下:
菌株 | 接种量 | 生长状况 | 回收率 | 菌落颜色 |
枯草芽孢杆菌ATCC 6633 | 50-100 | 良可 | 20-30% | 黄绿色至绿色 |
蜡样芽孢杆菌ATCC 10876 | 50-100 | 好-旺盛 | ≥50% | 淡蓝色,大而扁平,含蓝色中心 |
苏云金杆菌ATCC10792 | 50-100 | 好-旺盛 | ≥50% | 淡蓝色,大而扁平,边缘不规则 |
巨大芽孢杆菌ATCC 14581 | 50-100 | 好-旺盛 | ≥50% | 黄色,黏液状 |
凝结芽孢杆菌 ATCC 7050 | 50-100 | 好-旺盛 | ≥50% | 粉色,小而突起的菌落 |
短小芽孢杆菌ATCC 14884 | 50-100 | 好-旺盛 | ≥50% | 淡绿色至绿色 |
金黄色葡萄球菌ATCC 25923 | 50-100 | 旺盛 | ≥50% | 黄色菌落 |
粪肠球菌 ATCC 29212 | 50-100 | 旺盛 | ≥50% | 淡绿色至绿色 |
嗜热脂肪芽孢杆菌(注:在55°C培养) | 50-100 | 旺盛 | ≥50% | 黄色菌落 |
如只需要分离和计数蜡样芽孢杆菌或苏云金杆菌时,可以加添加剂硫酸多粘菌素B(货号FD003),这样其他芽孢杆菌和杂菌就不会生长了。
该显色培养基也能鉴别嗜热脂肪芽孢杆菌和凝结芽孢杆菌。已知在罐头食品中,这两种菌是常见的食品菌,也称为平酸菌,产酸而不产气,常引起食品发生化学或物理性质变化。它们对热的抵抗力强,适生长温度为45-55度。嗜热脂肪芽孢杆菌在低酸性食品中常见,而凝结芽孢杆局在酸性食品中常见。
微生物的存在与杀菌不*密切相关。同时,罐头食品污染了耐热性强的菌后, 仅依靠加热杀菌来防止罐头食品是相当困难的, 需要同时配合加强罐藏原辅料的卫生管理, 不使其被该菌污染,同时在生产过程中加强清洗, 不积压,尽量减少食品在杀菌前的细菌数量。
传统的对平酸菌的检测方法需要花费48~72小时,甚至更长时间才能获得检测结果,当特定关键控制点失控或微生物污染被发现的时候,早已错过了采取纠正行动的合适时间,产品已经堆满仓库,甚至已经在发往客户的路上。传统微生物检测和监控的滞后性亟需快速检测方法来弥补。芽孢杆菌显色培养基在快速鉴别芽孢杆菌方面具有优势,值得大力推广。