教你了解大肠杆菌O157：H7的传统检测方法

食源性致病菌的检测方法多种多样，传统的检测方法主要分为三类：培养和菌落计数法、免疫分析法和分子生物学方法。本文缔一生物主要问您介绍大肠杆菌O157：H7的传统检测方法。

传统的方法是培养和菌落计数法，即将可疑物的样本放在合适的条件下培养，统计菌落数目，并经过一系列的生化鉴定得出结果，本文将以我国检测大肠杆菌O157:H7的国家标准为例，介绍培养计数法检测大肠杆菌O157:H7的具体操作，图１给出了培养和菌落计数法的一般流程，主要依据国标GB4789.36—2016《食品安全国家标准 食品微生物学检验 大肠埃希氏菌O157:H7/NM检验》的方法。

通常情况下，样品中的细菌含量较低，无法迗到可检测的浓度，所以先是增菌。培养18-24小时之后取菌液涂布于麦康凯选择培养基上进行分离。很多细菌都会发酵山梨醇，产生红色菌落，而不发酵山梨醇的大肠杆菌O157:H7在麦康凯选择培养基（CT-SMAC 平板）上产生无色或者灰色的菌落。

这里推荐一款好用的CT-SMAC 平板，上微生物生产商HiMedia公司生产的大肠杆菌O157：H7显色培养基CT—SMAC平板（货号：M1340）。这是一款特异性强，灵敏度高的CT—SMAC平板。培养基中含有山梨醇，大肠菌群如肺炎克雷伯菌发酵山梨醇，产生粉红色菌落，大肠杆菌O157:H7不发酵山梨醇，为无色菌落。普通大肠杆菌则被鉴别为蓝绿色。大多数革兰氏阳性菌被结晶紫和胆盐抑制，优于普通的CT—SMAC平板。

后续进一步的血清学和生化试验鉴定，生化反应特征如表1。这种方法从２０世纪初开始使用，具有灵敏准确、成本低廉（8-12美元／样本）适用范围广等特点，被认为是检测微生物污染的金标方法。

表1大肠杆菌O157:H7／NM生化反应特征

通常情况下，微生物繁殖很快，即使加工食品中起始含量很低也能通过在储存和运输过程中的生长累积到一定的数量，从而对人体健康造成极大的威胁。所以，在尚未造成危害之前进行检测并采取一定的措施，对降低进一步污染，为政府和消费者提供及时可靠的数据，预防食源性疾病的暴发和扩大具有极为重要的意义。

缔一生物作为HiMedia公司在中国的代理商，在微生物培养和检测领域，一如既往地为您带来的服务。