微生物法测定叶酸含量的改进

叶酸是乳酸杆菌生长的必需营养素，微生物法检测叶酸是利用乳酸杆菌生长速度与叶酸含量相关的原理建立的。与其他叶酸检测的方法相比，微生物法具有许多优点：样品预处理简单、对设备要求不高、成本低廉等。

许多机构都将微生物法作为叶酸分析的标准方法，我国国家标准《婴幼儿配方食品和乳粉通用检验方法》中测定叶酸的方法即为微生物法。1988 年 Horrne 等应用 96 孔细胞培养板以干酪乳酸杆菌(Lactobacillias Casei)对叶酸进行微量检测，将甘油冷冻保存乳酸杆菌与96孔酶标板相结合，使得测定时间大为缩短。菌株对多数叶酸形式反应相似，能测定单和多谷氨酸叶酸，灵敏度很高，能达到ng 水平，具有较高的灵敏度和重现性。

这一方法对菌种的处理、分装和保存，以及操作过程都作了重大改进，已被认为是目前可靠、简便、迅速和微量检测叶酸的方法。

96 孔板微生物法测叶酸能够获得准确、可靠、重复性好的结果。稀释倍数对测定结果影响不大，结果稳定。考虑其成本低廉，样本预处理简单以及对设备要求不高等优点，适合于大批量测定，可用于大样本的血液流行病学研究。此方法还可用于其他生物组织和食品中叶酸含量的测定，这对国内开展叶酸检测有着较大的意义。

应用96孔板法测定叶酸含量时，选择测定用叶酸培养基，这里推荐的是上HiMedia公司生产的叶酸测定用培养基（货号：M543），该培养基由Himedia Laboratories生产，严格遵循标准，国产叶酸培养基含有痕量叶酸，易导致测定结果偏高，实验准确性比较差，HiMedia叶酸测定用培养基有认证的GMP，CE和FDA，ISO9001，ISO13485等证书，成分符合《GB5009.211-2014 食品安全国家标准 食品中叶酸的测定》，测定结果准确性高。