支原体PCR检测实验操作样品的收集

　　支原体PCR检测实验操作样品的收集
　　
　　支原体PCR检测实验操作
　　
　　PCR反应的前期操作应在无菌环境中进行。
　　
　　（1）样品的收集：待测细胞用抗培养基培养7d，用无菌容器取上清液500ul，4℃保存待测。
　　
　　（2）模板的制作：在无菌的条件下，取细胞培养上清100ul于一无菌的0.5ml塑料离心管内，盖好盖子，95℃水浴加热5min。
　　
　　（3）打开盖子，向管内加StrataCleanresin10ul，盖好盖子，旋涡混悬器混合，离心5—10s，吸取上清至一新的塑料离心管中，模板制作完毕，4℃保存。
　　
　　（4）PCR反应：反应体系zui适条件为：10mmol/lTris-HCL（pH8.38）；50mmol/lHCL；1.5-2.5mmol/lMgCL2；200umol/ldNTP；2UDapDNA聚合酶。总反应体系为50ul，反应用去离子水均需用12000uw/cm2紫外灯照射。
　　
　　VenorGeM支原体污染检测试剂盒（一步法）支原体PCR检测试剂盒组成：
　　
　　Mix干粉（引物、dNTP、热启动taq酶，内控对照），重悬缓冲液，阳性对照DNA，Tris/EDTA缓冲液。
　　
　　特点：
　　
　　广谱（包含常规26种支原体）
　　
　　灵敏度高
　　
　　特异性好
　　
　　操作简单
　　
　　便捷（整个操作不到3小时）