德国Minerva公司生产的Mynox支原体祛除剂是市面上惟一的支原体杀除剂,而其他牌子的支原体清除剂只是对支原体产生抑制作用,并无杀灭效果,因此作用很慢。本文缔一生物/缔一生物为您分析使用Mynox杀支原体应注意什么?
Mynox起效时间却只有2-3个小时。但在使用Mynox过程中,还需要注意一些问题,以保证zui大的使用效果。
1、Mynox加入的细胞量要控制。Mynox每管200?l,是加入到2ml包含1x104- 1x105细胞的培养液中。
2、细胞要注意打散为单细胞,不要让细胞成团。因为Mynox需要与支原体直接接触才能发挥效力。细胞成团容易造成细胞间隙,从而成为支原体的藏身之所。
3、Mynox与支原体污染的细胞的混合2个小时,即能完成支原体的杀灭。这时应换新鲜的培养基继续培养,不必再用Mynox。但这时不应马上用PCR检测支原体,因支原体虽然死亡,但培养液中还游离很多支原体DNA。应等传代三至四次后,再进行检测。
4、如果想延长Mynox作用时间至数天(细胞一代时间),期间应观察细胞状态。必要时换为标准培养基,或将Mynox与培养基按1:5稀释培养。
5、如果使用Mynox?消除污染细胞中的支原体,胎牛血清的*浓度为5%。过高浓度的血清会影响Mynox消除支原体的效果。如果使用Mynox消除病毒中的支原体,建议使用无血清的培养基。
6、包被病毒外层的脂质膜成分与支原体膜相似,也是Mynox结合的对象。根据使用Mynox?的浓度和作用时间,这些病毒极易被Mynox杀除。为了能够*杀除支原体同时保证病毒的继续培养,起始病毒滴度应高于106TCID50。
另外,或许有人疑问,Mynox只能杀灭细胞外的支原体,而对细胞内的支原体不起作用。这里需要澄清一下。事实上,细胞培养中产生的支原体污染就是细胞外的污染。只有一种支原体能进入到细胞内,就是Mycoplasma penetrans,但它并不污染体外培养的细胞。
综上所述,您是不是已经对使用Mynox杀支原体应注意什么,有所了解。如果还有其他疑问,请咨询缔一生物/缔一生物资深专家。