内毒素(Endotoxin)即革兰氏阴性菌细胞壁的脂多糖成分,菌体死亡崩解后释放出来。它又称热原质,会给机体带来一系列的不良反应,因此对生物制品需要进行内毒素测定。本文缔一生物/缔一生物为您分析内毒素是怎么检测的?
内毒素检测要用到一种鲎试剂。鲎是一种海洋节肢动物,形似蟹,身体呈青褐色,包被硬质甲壳。鲎的血液是淡蓝色的,一遇到细菌就会凝固。人们利用这一特点开发出鲎试剂,即将鲎血液中的变形细胞进行溶解,将溶解物制成的无菌冷冻干燥品。这里面含有能被微量内毒素激活的凝固酶原,从而产生浑浊效应。
常见内毒素方法有凝胶法、浊度法和显色法。浊度法是根据浊度变化而测定内毒素含量,显色法是利用凝固酶的特定底物显色来测定内毒素含量,这两种方法可以定量。凝胶法是根据鲎试剂与内毒素产生的凝集反应来定性或半定量内毒素的方法。凝固酶能使凝固蛋白原产生凝胶,可肉眼观察,不用特殊的仪器设备。
检测时,要注意鲎试剂的灵敏度,不同鲎试剂的灵敏度不同。一般要采用标准品进行鲎试剂灵敏度的复核。确定供试品zui大有效稀释倍数。同时实验器具也都要保证已去除热原。
综上所述,您是不是已经对内毒素是怎么检测的,有所了解。如果还有其他疑问,请咨询缔一生物/缔一生物资深专家。