牛血清是细胞培养中用量zui大的天然培养基,其含有丰富的细胞生长所必需的营养成分,具有促进细胞增殖和诱导细胞分化等极其重要的生物学功能。本文缔一生物/缔一生物为您分析灭能对新生牛血清有什么影响?
对新生牛血清进行灭能处理可灭活血清中可能污染的病毒、支原体等外源微生物,但也可能使血清内含有的细胞培养所需要的生物活性物质变性降解,从而影响细胞的培养。
武汉生物制品研究所曾对灭能对新生牛血清的影响进行了研究。他们用照射剂量为8和16kGy 的60Coγ-射线及56℃30min加热灭能新生牛血清,并和未灭能的新生牛血清分别培养Vero细胞和MRC-5 细胞。未灭能的新生牛血清培养的 Vero 细胞和MRC-5细胞状态,与传代前形态一致,细胞呈致密单层;用8和16kGy 60Coγ-射线照射灭能的新生牛血清培养的Vero细胞和 MRC-5 细胞数量较少,每视野下约占 90%;经 56 ℃30 min灭能的新生牛血清培养的 Vero 细胞和 MRC-5 细胞数量zui少,每视野下约占 50%。从生长曲线和倍增时间上看,未灭能新生牛血清培养的两种细胞增殖更多更快速;其次是γ-射线照射灭能的血清,zui后是热灭能的新生牛血清。
作者认为,γ-射线照射灭能和56℃30 min 热灭能对新生牛血清中的成分均有一定程度的破坏,其中γ-射线照射对新生牛血清成分的破坏性较小,56 ℃30 min 热灭能对新生牛血清的成分破坏性较大。
因此,如非实验必要,则无需对新生牛血清进行热灭活。
参考文献
赵新华等. 灭能与未灭能新生牛血清培养细胞效果的比较. 中国生物制品学杂志. 2015, 28 ( 9): 923